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求原核表達詳細步驟

【求原核表達詳細步驟】基本步驟:
目的基因的擴增、載體與目的基因雙酶切、電泳、割膠回收、目的基因與載體的連接反應、重組體篩選、驗證重組體、轉(zhuǎn)化入大腸桿菌進行表達 。
問題在于:目的基因如何獲取 , 擴增策略的決定 , 表達載體的選擇 , 雙酶切選擇哪一對限制性內(nèi)切酶 , 如何篩選重組體等等 。

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