基因表達(dá)載體的構(gòu)建,即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心,其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 , 并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 。
構(gòu)建條件:
1、必須能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制 , 使重組基因能夠在宿主基因中復(fù)制,從而穩(wěn)定保存下來(lái) , 這是作為運(yùn)載體的必須條件 。
【關(guān)于基因表達(dá)載體的構(gòu)建】2、具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),從而可以使不同的粘性末端與之相連,增強(qiáng)實(shí)用性 。
3、擁有標(biāo)記基因 , 方便質(zhì)粒進(jìn)入宿主細(xì)胞后容易被檢測(cè)出來(lái),以便檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體 。
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