統計菌落數目的方法,成功統計菌落數目的關鍵

統計菌落數目的方法

統計菌落數目的方法,成功統計菌落數目的關鍵

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統計菌落數目的方法有:直接計數法和間接計數法兩種 。直接計數法這類方法是利用血球計數板,在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數量 。此法的缺點不能區分死菌與活菌 。
菌落,是指由單個或少數微生物細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度,形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態、構造等特征的子細胞集團 。
成功統計菌落數目的關鍵用萬深HiCC系列全自動菌落計數分析系統,即可輕松搞定各類菌落數目的自動統計 。建議選:6平皿同時成像分析的掃描款(如:HiCC-G、HiCC-S等),因其光線均勻性高于任何廠家拍照款的燈箱光源,故其可實現非常簡單的傻瓜式操作 。建議:百度選視頻,搜菌落計數來看,以評估其分析的效果效率 。
微生物計數方法有哪些測定微生物細胞數目的方法有很多,介紹幾種
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,并求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用于測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋涂布平板法
原理:每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適于測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地涂布在玻片上的一定面積上,經固定染色后在顯微鏡下計數,這樣又稱涂片計數法.染色可用臺盼藍,臺盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然后將濾膜干燥、染色,并經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積上)的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目:將已知體積的水過濾后,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
【統計菌落數目的方法,成功統計菌落數目的關鍵】此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可借助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中“除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.”這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋涂布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
菌落計數方法平板菌落計數法,是種統計物品含菌數的有效方法 。方法如下:將待測樣品經適當稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個細胞,取一定量的稀釋樣液涂布到平板上,經過培養,由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞;統計菌落數,根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數 。
但是,由于待測樣品往往不宜完全分散成單個細胞,所以,長成的一個單菌落也可能來自樣品中的2~3或更多個細胞 。因此平板菌落計數的結果往往偏低 。為了清楚地闡述平板菌落計數的結果,現在已傾向使用菌落形成單位(cfu :colony-forming
units),而不以絕對菌落數來表示樣品的活菌含量 。

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