PCR擴增時,體系中有多種模板對結果有什么影響?

科學興農為您解答 。

這種問題建議您去小木蟲去咨詢,作為學術性探討問題,悟空問答平臺上面對這一塊接觸的人數畢竟還是太少 。不過既然看到了,就針對您這個問題做一下簡單的解答 。

關于您的問題來說,首先要搞清楚您PCR的目的是什么,如果說是為了檢測某個基因的存在,當你加入 多種模板的時候可能會對結果形成干擾,也就是說擴增到另外一個模板上的片段,如果說模板A和B的擴增帶型大小不一致的話,這時候自然擴增結果也就是兩條帶,那么這個時候您該如何判定帶型呢?如果說差別是很大的話還好,但是如果僅僅差別了幾十個堿基的話,也就難以分辨誰是誰了(瓊脂糖凝膠電泳) 。

再舉個例子來說,如果說您是檢測一堆種子是否被轉基因所污染,以Kan抗性來說,只需要檢測NTPII即可,這個時候,我只需要將一堆樣品的模板混合在一起,來做PCR,如果能夠檢測出條帶的話,必然是被 污染了,這個時候,將模板混合在一起要比模板分別做樣品檢測省出很多功夫 。

【PCR擴增時,體系中有多種模板對結果有什么影響?】實驗要靈活,根據您的目的自由分配您的實驗,不能污染的地方必然不能污染,而可以污染的地方您“污染”的處理反而可能是捷徑!

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