1. 首頁 > 健康養生 >

多克隆大容量組合CAR細胞庫實現骨髓瘤高特異性Anti-CD38 CAR-T細胞的快速篩選


多克隆大容量組合CAR細胞庫實現骨髓瘤高特異性Anti-CD38 CAR-T細胞的快速篩選
本文插圖



嵌合抗原受體T細胞療法（CAR-T therapy）是繼手術治療、化療、放療之后的一種新型腫瘤免疫治療方法 ， 主要是通過體外細胞工程化改造 ， 激活和增強人體的免疫細胞（如T細胞）使其重新識別腫瘤細胞上特定的抗原蛋白 ， 從而引導T細胞高效地殺死腫瘤細胞 。 由于腫瘤特異性抗原蛋白（TSA）非常有限 ， 大部分可用靶點為腫瘤相關抗原蛋白（TAA） ， 即在正常細胞和腫瘤細胞表面同時都有表達 。 傳統的篩選方法以高親和力為指標選擇嵌合抗原受體（CAR） ， 無法區分腫瘤細胞和正常細胞 。
在臨床中 ， 傳統的CAR-T細胞在殺傷癌細胞的同時會攻擊正常細胞 ， 從而對患者正常生理功能產生副作用 。 除此之外 ， 傳統的CAR序列篩選策略是以構建單克隆T細胞為基礎 ， 而腫瘤免疫逃逸的一個重要手段是通過“靶位衍生”（epitope spreading）, 導致單克隆開發的CAR-T細胞不可避免地會面臨免疫耐受問題 。 因此 ， 開發能選擇性識別腫瘤細胞和正常細胞的多克隆CAR篩選平臺 ， 是推動CAR-T療法進一步拓展的關鍵步驟 。
近日 ， 上海科技大學免疫化學研究所 Richard Lerner 教授團隊和楊光教授團隊合作 ， 在 Advanced Science 期刊發表了題為：Avidity-Based Selection of Tissue-Speci?c CAR-T Cells froma Combinatorial Cellular Library of CARs 的研究論文 。
研究團隊開發了一個以組合庫技術為基礎 ， 利用細胞-細胞之間的相互作用進行快速篩選的多克隆組合CAR細胞庫（CCC）策略 。
【多克隆大容量組合CAR細胞庫實現骨髓瘤高特異性Anti-CD38 CAR-T細胞的快速篩選】
多克隆大容量組合CAR細胞庫實現骨髓瘤高特異性Anti-CD38 CAR-T細胞的快速篩選
本文插圖


該CCC文庫以人源抗體基因序列為基礎 ， 進行分子重排后 ， 建立一個展示于活細胞表面的高多樣性CAR文庫 。 整合了CAR基因文庫的細胞攜帶有適合快速分選的報告基因 ， 可通過細胞間的相互作用直接進行CAR的Avidity篩選 。 當前CCC研究顯示 ， 通過CCC與CD38低表達的正常細胞和CD38高表達的腫瘤細胞孵育進行負向和正向差異化篩選 ， 可獲得多條有效CAR序列 ， 其中包括優選序列RP02 。
比較RP02與以傳統抗體篩選方式所獲的序列028 ， 雖然RP02的親和力弱于028 ， 但是裝載了RP02的CAR-T細胞無論是在對腫瘤細胞的特異性殺傷還是細胞因子分泌等方面均要優于裝載了028的CAR-T細胞 。
同時 ， RP02的CD38在安全性方面更勝一籌 ， 當RP02-CAR-T細胞和028-CAR-T細胞分別與低表達CD38的正常細胞共孵育后 ， RP02-CAR-T細胞可以與76%以上的CD38低表達的正常細胞共存且不被激活；而高親和力的028-CAR-T細胞則依然可以被激活并清除了95%以上的CD38低表達的正常細胞 。
通過CD38的mRNA定量研究發現 ， RP02和028區分腫瘤細胞和正常細胞的關鍵因素是CD38在細胞中的表達量 。 結構表征也進一步證明RP02在CD38上的結合靶位亦不同于028 。 所構建的RP02 CAR-T細胞在小鼠的體內抑瘤實驗中顯示良好的治療效果 。

多克隆大容量組合CAR細胞庫實現骨髓瘤高特異性Anti-CD38 CAR-T細胞的快速篩選
本文插圖


該研究為解決CAR-T開發過程中所面臨的特異性靶點不足 ， 無法區分腫瘤/正常細胞所造成的脫靶效應 ， 以及免疫細胞治療中的免疫耐受問題提供了一種新策略 ， 具有十分廣闊的應用和轉化前景 。
論文鏈接：
本文轉載自其他網站 ， 不代表健康界觀點和立場 。 如有內容和圖片的著作權異議 ， 請及時聯系我們（郵箱：guikequan@hmkx.cn）

    推薦閱讀