1. 首頁 > 健康養生 >

【衡道丨干貨】針對 ESD 病理切片鏡像倒影的技術改進


對ESD標本精準療效評估取決于ESD術后全面精確的病理學檢查 ， 而準確的病理診斷又離不開病理技術的支撐 。 但是常規病理制片會帶來「鏡像倒影」問題 ， 影響復原圖的制作 。 最近發表于診斷病理學雜志（2021年1月第28卷第1期）的一篇技術文章 ， 就探究著解決這一問題 。
今天的推文就帶大家了解這一內容 ， 并以期與各位病理技術人員一起交流學習 。
內鏡下黏膜下剝離術（endoscopic submucosal dissection ， ESD）是在內鏡黏膜切除術的基礎上改進而來 ， 成為近年來一項有效治療消化道早癌的技術手段 ， 對2cm以上的早癌和癌前病變進行一次性完整黏膜剝離 。 該技術由日本專家Ono等在2001年首次報道并命名 ， 優勢在于可以免除開腹手術和器官切除的痛苦 ， 具有創傷小、恢復快、患者可接受多個部位多次治療以及使病理醫生獲得完整的組織病理標本以供分析等優點 ， 臨床應用前景好 。
通過ESD技術完整切除的消化道早癌病變是否達到根治的療效需要病理學檢查評估 ， 內容包括病變性質、組織學分型、黏膜下浸潤深度、有無神經和脈管浸潤、切緣情況等 。 對ESD標本精準療效評估取決于ESD術后全面精確的病理學檢查 ， 而準確的病理診斷又離不開病理技術的支撐 。 但是常規病理制片會帶來 「鏡像倒影」問題 ， 影響復原圖的制作 。
倘若能夠解決「鏡像倒影」問題 ， 使切片中的組織條順序和方向與大體標本圖片中的順序和方向能夠保持一致 ， 就可以縮短制作復原圖的時間 ， 大大提高工作效率 。
論文筆者不斷嘗試摸索 ， 最終聚焦于夾塊、攤片、撈片的環節 ， 化無序為有序 ， 統一了夾蠟塊的方向、反向攤片、撈片時確保組織的方向和順序 。 通過這一改進 ， 「鏡像倒影」問題得到了順利解決 ， 復原圖的制作也更加方便快捷 。 現將該技術改進 ， 簡述如下：
方法
1、取材
①取材前第一次拍照記錄收到標本時的狀態 ， 包含病理號、標尺和標本是否標記口肛側 。
②拔除釘子 ， 觀察病變及位置、范圍 ， 行第二次拍照 。
③取材及描述 ， 包括黏膜的長徑、寬徑、厚度、病變距各切緣的距離及病變類型和大小；改刀方向沿病灶最近切緣切線垂直方向進行切割 ， 取材以病變中央偏右1mm下刀 ， 再按2-3mm的距離向兩側平行地切割組織 ， 全瘤取材 ， 行第三次拍照 ， 留照利于定位比對復原圖 。 當組織條長度超過3.5cm時 ， 即超過包埋模具的實際長度 ， 需要在平行切緣切線進行分割 。 特別指出的是 ， 要盡量避開病變 ， 最大限度的保留病灶的完整性 。
④把改刀后的標本按從左往右的順序進行編號 ， 將組織條有序地放入脫水盒 。 脫水盒先墊一層薄海綿 ， 放入組織后再覆蓋一層薄海綿 。 雙層海綿可以確保組織條的平整有序 ， 避免脫水過程造成的扭曲和串位 ， 每個脫水盒放入的組織條數不宜超過4條 。

2、脫水 全自動脫水機 ， 脫水程序耗時14h 。

3、包埋 立埋組織、有序包埋 。
①輕去海綿 ， 保留位置關系 。
②把包埋盒的標簽方向擺放向右 ， 按照編號順序 ， 依次平行、等距、居中立埋于模具中 ， 附上包埋盒 ， 待蠟塊降溫成形后 ， 脫去模具 ， 形成組織蠟塊 。

4、切片統一豎夾蠟塊 ， 標簽端朝下 ， 進行切片（圖2A） 。

5、反手攤片 用眼科鑷把蠟片以光面向上的朝向輕輕平移入恒溫水缸中 ， 展平蠟片 。 反手勢將蠟片從左至右漂于水中（圖2B） 。

6、撈片 保證口肛側方向和從左至右的位置順序 ， 蠟片的長軸與玻片長軸成平行關系 ， 貼附于玻片中央（圖2C） 。

7、烤片 溫度 70 ℃ ， 20 min 。

8、染色及封片 使用染色封片一體機 ， 完成HE切片 。

9、定位對比 HE切片可與取材固定位比對、直至復原（圖2D） 。

【衡道丨干貨】針對 ESD 病理切片鏡像倒影的技術改進
本文插圖
【衡道丨干貨】針對 ESD 病理切片鏡像倒影的技術改進
本文插圖
圖2A 統一方向豎夾蠟塊 ， 把標簽端向下；圖2B 為改良攤片 ， 用眼科鑷把蠟片以光面向上的朝向輕輕平移入恒溫水缸中 ， 展平蠟片 。 反手勢將蠟片從左至右的漂于水中；圖2C 為復原關系、順序清晰的 HE 切片；圖2D 為復原圖 ， 復原順利 。

結果

常規制片可以滿足病理醫師對組織學分型、黏膜和脈管有無浸潤、切緣有無殘留等的診斷要求 ， 但是制片過程中 ， 由于技術人員操作手法習慣不一致 ， 導致眼觀直視下切片中的組織條與對應的大體標本圖片上的位置及順序相反 ， 如同照鏡子一樣 ， 即出現「鏡像倒影」 ， 給閱片和標記腫瘤位置、切緣方位帶來困擾 ， 最終不能順利準確對應復原圖 。 針對鏡像倒影 ， 該方法改進 ， 改變了常規的攤片手法 ， 規定了夾塊方向 ， 統一了撈片習慣 ， 徹底解決「鏡像倒影」的問題 ， 使得每一例ESD標本的HE常規切片均能輕松、精準定位復原圖 。

推薦閱讀