91精品国产手机在线-白筒袜嫩萝双腿之间乳白液体-青青操手机在线视频观看-日本中文字幕人妻日韩-日韩精品在线观看视频网站-天堂资源中文最新版在线一区-欧美专区一区二区三区-国产综合亚洲欧美在线-国产精品久久久久久福利69堂

  1. 首頁 > 健康養(yǎng)生 >

葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體的應(yīng)用



背景[1-3]

葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體是一類可以特異性結(jié)合葡萄糖-6磷酸脫氫酶的多克隆抗體 ， 主要用于體外檢測葡萄糖-6磷酸脫氫酶的相關(guān)實驗 。

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶glucose 6-phosphatedehydrogenase是糖酵解途徑、檸檬酸循環(huán)以外的另一個葡萄糖分解途徑的磷酸葡萄糖酸途徑（磷酸戊糖途徑）中的第一個酶EC1.1.1.49 。

很早就稱為6-磷酸葡糖脫氫酶（zwischenferment） ， 它催化6-磷酸葡萄糖脫氫 ， 形成6-磷酸葡糖酸 。 以NADP為電子受體 。 整個反應(yīng)的平衡是趨向于NADPH的生成 ， 后者用于脂肪酸等的還原性生物合成反應(yīng) 。 本酶存在于細胞的可溶性部分 。


葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體的應(yīng)用
本文插圖



葡萄糖-6磷酸脫氫酶

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶主要參與磷酸戊糖途徑 ， 也能緩慢地作用在β-D-葡萄糖等其他糖類上 。 這種酶可由其底物葡萄糖-6-磷酸激活 ， 如果人類表達葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的基因G6PD有缺陷 ， 將會導(dǎo)致葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥 ， 引發(fā)非免疫性溶血性貧血 。 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶存在于眾多生物細胞內(nèi) ， 高等植物擁有數(shù)種葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的蛋白異構(gòu)體（protein isoform） ， 它們分布于細胞質(zhì)基質(zhì)、和過氧化物酶體等細胞結(jié)構(gòu)中 。

應(yīng)用[4][5]

用于海膽受精卵中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶定位及定量方法的建立和應(yīng)用

以模式生物海膽為試驗材料,利用低溫冷凍半薄切片技術(shù),研究比較了免疫金銀染色和免疫熒光兩種方法,試驗歸納了它們各自的特點及適用性;

并利用這兩種技術(shù)方法對海膽卵細胞受精過程中關(guān)鍵酶蛋白——葡萄糖-6-磷酸脫氫酶進行了定位及定量研究;

此外,利用in vivo圖像分析技術(shù)和“灰度-吸光度”技術(shù),以葡萄糖-6-磷酸脫氫酶為目標蛋白,探討了實時測定活體卵細胞受精過程中酶蛋白活性變化的可行性,并分析了葡萄糖-6-磷酸脫氫酶在受精過程中的活性變化 。

（1）利用基于低溫冷凍半薄切片的免疫金銀染色技術(shù),標記具有較高持久性,此方法尤其適用于酶蛋白的定量分析以及在與其他組織化學(xué)手段相結(jié)合的條件下進行的活性研究;而免疫熒光技術(shù),清晰的活性標記可以很容易的被觀測到,是研究酶蛋白定位的合適手段 。

（2）基于這兩種技術(shù)的比較分析,隨后試驗采用免疫熒光技術(shù)對海膽卵細胞受精過程中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶進行了定位分析 。 研究發(fā)現(xiàn),在未受精的卵細胞中,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶主要堆積于皮層顆粒內(nèi)或附著于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上 。 經(jīng)過受精刺激之后,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶被從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和皮層顆粒中釋放出來 。 同時,采用免疫金銀染色方法定量分析了海膽卵細胞受精過程中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶蛋白量的變化 。 測量結(jié)果顯示為逐漸下降趨勢,單因素方差和同類子集分析表明,未受精卵細胞內(nèi)G6PDH含量和受精后卵細胞內(nèi)G6PDH含量存在顯著差異（p<0.05） 。

（3）利用in vivo圖像分析技術(shù)對葡萄糖-6-磷酸脫氫酶在受精過程中的活性進行了研究 。 試驗在方法上通過生物化學(xué)、物理光學(xué)、影像學(xué)的有機結(jié)合,實現(xiàn)了在不破壞細胞的前提下,對存活海膽卵細胞的受精過程中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的活性進行了實時監(jiān)測和定量分析 。 #抗體#

參考文獻

[1]Calcium and fertilization:the beginning of life[J].Luigia Santella,Dmitri Lim,Francesco Moccia.Trends in Biochemical Sciences.2004(8)

[2]Activation of multidrug efflux transporter activity at fertilization in sea urchin embryos（Strongylocentrotus purpuratus）[J].Amro M.Hamdoun,Gary N.Cherr,Troy A.Roepke,David Epel.Developmental Biology.2004(2)

[3]Egg Activation at Fertilization:Where It All Begins[J].Linda L.Runft,Laurinda A.Jaffe,Lisa M.Mehlmann.Developmental Biology.2002(2)

[4]Glucose-6-phosphate dehydrogenase:the key to sex-related xenobiotic toxicity in hepatocytes of European flounder（Platichthys flesus L.）[J].Aquatic Toxicology.2002(4)

【葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體的應(yīng)用】[5]王婷婷.海膽（Psammechinus miliaris L.）受精卵中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶定位及定量方法的建立和應(yīng)用[D].中國海洋大學(xué),2009.

    推薦閱讀